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熒光PCR檢測(cè)試劑盒存儲(chǔ)及使用注意事項(xiàng)
2023-06-06
熒光PCR檢測(cè)試劑盒是一種用于在PCR反應(yīng)中檢測(cè)特定DNA序列的試劑盒。這種試劑盒包括引物、熒光探針和緩沖液,它們的作用相互協(xié)同,實(shí)現(xiàn)PCR反應(yīng)的同時(shí)進(jìn)行熒光信號(hào)檢測(cè)。熒光PCR檢測(cè)試劑盒使用步驟:1.提取目標(biāo)DNA:從待檢測(cè)的樣品(如血、組織等)中提取目標(biāo)DNA,并加入PCR反應(yīng)管中。2.PCR反應(yīng)體系準(zhǔn)備:將PCR反應(yīng)體系中所需要的檢測(cè)試劑盒配制好,根據(jù)試劑盒說(shuō)明書(shū)加入引物、熒光探針及緩沖液等試劑,并混合均勻。3.反應(yīng)條件設(shè)定:根據(jù)待擴(kuò)增的DNA片段大小和設(shè)計(jì)的引物溫度,...
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熒光PCR檢測(cè)試劑盒的工作原理是什么?
2023-05-06
熒光PCR檢測(cè)試劑盒是一種廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的工具,它可以快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)目標(biāo)DNA序列的存在與否。該試劑盒通常包括反應(yīng)體系所需的各種酶和試劑,以及熒光探針或熒光染料等熒光標(biāo)記物。有許多優(yōu)點(diǎn),其中突出的是其高靈敏度和特異性。由于熒光信號(hào)可以被放大,因此即使目標(biāo)DNA只有極少量,也能夠被檢測(cè)到。此外,檢測(cè)試劑盒還可以檢測(cè)多個(gè)靶標(biāo)DNA序列,因此在同時(shí)篩查多種病原體時(shí)非常有用。熒光PCR檢測(cè)試劑盒的工作原理是利用PCR技術(shù)對(duì)目標(biāo)DNA進(jìn)行擴(kuò)增,并通過(guò)熒光信號(hào)實(shí)現(xiàn)檢測(cè)。...
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免疫組化問(wèn)題解答
2023-04-03
一.染色過(guò)強(qiáng)原因解決方法1.抗體濃度過(guò)高或孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)降低抗體滴度、抗體孵育時(shí)間:室溫1小時(shí)或4度過(guò)夜2.孵育溫度過(guò)高超過(guò)37度一般在室溫20-28度cDAB顯色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或濃度過(guò)高顯色時(shí)間不超過(guò)5-12分鐘,以顯微鏡下觀察為準(zhǔn)。二.非特異性背景染色原因解決方法1.操作過(guò)程中沖洗不充分每步?jīng)_洗3次每次5分鐘2.組織中含過(guò)氧化物酶未阻斷可再配置新鮮3%H2O2封閉孵育時(shí)間延長(zhǎng)3.組織中含內(nèi)原性生物素正常非免疫動(dòng)物血清再封閉4.血清蛋白封閉不充分延長(zhǎng)血清蛋白封閉時(shí)間。三.染色弱原因...
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細(xì)胞株和菌株【豬靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞】注意事項(xiàng)
2023-03-29
細(xì)胞株和菌株【豬靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞】注意事項(xiàng):1.實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,無(wú)菌室及無(wú)菌操作臺(tái)(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面,并開(kāi)啟無(wú)菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘后,才開(kāi)始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株,且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后,將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái),以70%ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無(wú)菌操作臺(tái)運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘以上后,再進(jìn)行下一個(gè)細(xì)胞株之操作。2.無(wú)菌操作工作區(qū)域應(yīng)保...
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熒光PCR檢測(cè)試劑盒常常需要精細(xì)操作
2023-03-15
熒光PCR檢測(cè)試劑盒是一種常用的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)工具,被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)、環(huán)境科學(xué)、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域。其作用是在PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))過(guò)程中通過(guò)熒光信號(hào)檢測(cè)DNA序列特定變化,檢驗(yàn)?zāi)繕?biāo)DNA是否存在、是否出現(xiàn)特定變異或突變等。工作原理:PCR是一種在體外以無(wú)細(xì)胞為基礎(chǔ)的DNA復(fù)制技術(shù),包括DNA的兩個(gè)變性、引物、擴(kuò)增和DNA的再生。PCR檢測(cè)試劑盒的工作原理基本上是利用PCR技術(shù),通過(guò)引入熒光標(biāo)記物或探針來(lái)檢測(cè)PCR產(chǎn)物,轉(zhuǎn)化DNA目標(biāo)序列的檢測(cè)結(jié)果為熒光信號(hào)。熒光PCR檢測(cè)...
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實(shí)驗(yàn)室常用的保菌方法
2023-03-11
菌種保藏是指保持微生物菌株的活力和遺傳性狀的技術(shù)。微生物在使用和傳代過(guò)程中容易發(fā)生污染、變異甚至死亡,因而常常造成菌種的衰退。菌種保藏的目的就是使菌株存活、不丟失、不污染雜菌、不發(fā)生或少發(fā)生變異,保持菌種原有的活性和各種特征。菌種保藏的基本原理是使微生物的生命活動(dòng)處于半永jiu性的休眠狀態(tài),也就是將微生物的新陳代謝作用限制在最di范圍內(nèi)。實(shí)驗(yàn)室常用的保菌方法有:甘油保菌法、斜面保菌法、穿刺保菌法、液體石蠟覆蓋保藏法、沙土保藏法、冷凍干燥法。微基生物在以上幾種菌種保藏方法的基礎(chǔ)...
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PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成
2023-03-02
人乳清蛋白(hLALBA)轉(zhuǎn)基因熒光PCR試劑盒適用于檢測(cè)氣管分泌物拭子、肺組織等樣本中的人乳清蛋白(hLALBA)轉(zhuǎn)基因,用于人乳清蛋白(hLALBA)轉(zhuǎn)基因感染的輔助診斷,其檢測(cè)結(jié)果僅供參考。PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成:①模板DNA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一定時(shí)間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,為下輪反應(yīng)做準(zhǔn)備;②模板DNA與引物的退火(復(fù)性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至...
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細(xì)胞復(fù)蘇、傳代與凍存操作流程
2023-03-02
細(xì)胞復(fù)蘇、傳代與凍存操作流程儀器與試劑儀器試劑耗材離心機(jī)胎牛血清(FBS)離心管(15ml、50ml)生物安全柜無(wú)菌1×PBSpH=7.2T-25細(xì)胞培養(yǎng)瓶電動(dòng)移液器0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA一次性無(wú)菌移液管(2ml、5ml、10ml)CO2培養(yǎng)箱wan全培養(yǎng)基(含血清)1.8mL凍存管倒置顯微鏡液氮罐凍存液:90%FBS+10%DMSO異丙醇程序降溫盒恒溫水浴鍋超低溫冰箱護(hù)目鏡、厚毛線(xiàn)手套等操作流程復(fù)蘇1)將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到37℃;2)準(zhǔn)備一支15ml離心...