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當(dāng)前位置:首頁(yè)產(chǎn)品中心科研細(xì)胞原代細(xì)胞復(fù)蘇/凍存人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞
人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞:瘢痕疙瘩是一種具有浸潤(rùn)生長(zhǎng)特性的病理性瘢痕,治療后復(fù)發(fā)率高。成纖維細(xì)胞是瘢痕疙瘩形成與增生的效應(yīng)細(xì)胞,瘢痕疙瘩組織學(xué)特點(diǎn)為大量成纖維細(xì)胞增生。

產(chǎn)品型號(hào):復(fù)蘇/凍存
更新時(shí)間:2024-07-09
廠(chǎng)商性質(zhì):生產(chǎn)廠(chǎng)家
訪(fǎng)問(wèn)量:595
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人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞


產(chǎn)品名稱(chēng) :人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品貨號(hào) :YLK-XB0513h

組織來(lái)源 :皮膚組織

產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶


細(xì)胞簡(jiǎn)介:


瘢痕疙瘩是一種具有浸潤(rùn)生長(zhǎng)特性的病理性瘢痕,治療后復(fù)發(fā)率高。成纖維細(xì)胞是瘢痕疙瘩形成與增生的效應(yīng)細(xì)胞,瘢痕疙瘩組織學(xué)特點(diǎn)為大量成纖維細(xì)胞增生。


細(xì)胞特性


1)細(xì)胞來(lái)源于手術(shù)切除的瘢痕疙瘩組織。

2)細(xì)胞鑒定:纖維連接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色為陽(yáng)性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:成纖維樣細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。


培養(yǎng)信息


培 養(yǎng) 基 : 含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 : 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 : 貼壁
細(xì)胞形態(tài) : 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 : 可傳3-5代左右
傳代比例 : 1:2
消 化 液 : 0. 25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 : 氣相 : 空氣,95% 。C O2,5%


該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


客戶(hù)收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作


1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀(guān)察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀(guān)察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1) 收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀(guān)察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
5) 原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時(shí),需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒(méi)貼好影響實(shí)驗(yàn)。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴(lài)氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細(xì)胞種類(lèi)而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被。


注意事項(xiàng)


1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,胰/酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪(fǎng)直至問(wèn)題得到解決。



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