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atcc菌種的培養(yǎng)有哪些要求?

更新時間:2025-05-30      點擊次數(shù):30

  atcc菌種的培養(yǎng)要求嚴(yán)格,需遵循標(biāo)準(zhǔn)化操作流程,確保菌種的活性、純度和遺傳穩(wěn)定性。

  一、atcc菌種培養(yǎng)基要求:

  1.使用指定配方:

  必須按照ATCC或說明書提供的特定培養(yǎng)基配方,不可隨意替換成分。

  2.培養(yǎng)基制備與滅菌:

  自制培養(yǎng)基需高壓滅菌,冷卻至50℃以下再倒板或分裝。

  市售培養(yǎng)基需選擇可靠品牌,并檢查保質(zhì)期和批號一致性。

  3.添加特殊成分:

  部分菌種需額外添加生長因子、抗生素(如萬古霉素)或血液(如羊血、馬血)。

  二、atcc菌種操作規(guī)范要求:

  1.無菌操作:

  接種前用75%酒精擦拭臺面和器械,接種環(huán)需灼燒滅菌(酒精燈火焰中加熱至通紅)。

  凍干菌種復(fù)蘇時,需快速解凍,避免污染。

  2.傳代限制:

  避免頻繁傳代,否則可能導(dǎo)致基因變異或活力下降。

  長期保存需用甘油管(-80℃)或液氮冷凍保存。

  3.污染防控:

  定期清潔培養(yǎng)箱,清除污染皿,并用紫外燈消毒。

  若發(fā)現(xiàn)雜菌污染(如霉菌斑點),立即棄用并復(fù)查操作流程。

  三、atcc菌種保存與管理要求

  1.短期保存:

  斜面低溫保存:菌種接種于斜面培養(yǎng)基,37℃培養(yǎng)后密封,4℃保存(通常1-4周)。

  甘油冷凍保存:菌液與30%甘油混合(1:1),存入-80℃冰箱或液氮罐。

  2.長期保存:

  液氮罐為最佳方法,需定期補(bǔ)充液氮。

  凍干法(需專業(yè)設(shè)備):真空凍干后密封,室溫或4℃保存。

  3.存活性驗證:

  定期復(fù)蘇菌種(如每半年一次),檢查生長狀態(tài)(菌落形態(tài)、革蘭染色結(jié)果)。

  若活力下降,需從原始凍存管重新接種。

  
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